1、 試驗(yàn)用菌種:試驗(yàn)用下圖所列菌種.所有菌種應(yīng)同時(shí)使用.如果試驗(yàn)采用其他兩種,并在試驗(yàn)記錄卡中注明.
2、菌種應(yīng)放在有瓊脂作培養(yǎng)基的試管內(nèi).培養(yǎng)霉茵用的培養(yǎng)基見附錄A(補(bǔ)充件).
3、菌種應(yīng)保存在5-10度的冰箱內(nèi).
4、制備袍子懸液的霉菌,生長(zhǎng)期一般為14-21天,但不得少于14天,多于28天.
5、未到制備于孢子懸液時(shí),不得拔去菌種容器的棉塞.每打開一支菌種管只供制備一次懸液.每次制備孢子懸液必須使用新培養(yǎng)的菌種.
6、孢子懸液的制備
a.在培養(yǎng)管中在所需的菌種上注入1OmL加有0.05%無(wú)殺菌作用的孢子濕潤(rùn)劑(如聚經(jīng)基乙烯油酸山梨醇酑,或聚輕基乙烯硬脂山梨醇)的蒸餾水.
b.用火焰滅菌過(guò)的鉑絲環(huán)或鎳鉻絲環(huán)(接種環(huán))小心地刮出袍子,
c.將各菌種的抱子懸液通過(guò)一層薄的無(wú)菌玻璃棉過(guò)濾到一無(wú)茵的玻璃瓶中,孢子混合懸液需進(jìn)行離心沉淀,然后倒出浮在上層的液體.將沉淀物(孢子)摻加到無(wú)茵蒸餾水中,再進(jìn)行離心沉淀,倒出浮在上層的液體,這個(gè)過(guò)程重復(fù)進(jìn)行三次,然后將純抱子和加有0.05%不會(huì)起殺菌作用的濕潤(rùn)劑的100mL無(wú)菌蒸餾水一起倒入一個(gè)無(wú)菌的玻璃瓶中并搖蕩使孢子徹底混合。