♠　【摘要】目的建立薄層-紫外分光光度（TLC-UV）法測(cè)定多序巖黃芪根中芒柄花素的含量。
♠　方法在25℃、吸收波長(zhǎng)248nm處測(cè)定芒柄花素的吸收度結(jié)果此法線性范圍0.01～0.06mg/ml內(nèi)，r=0.9996，平均回收率為97.55%，RSD為1.6%（n=8）。結(jié)論操作方法簡(jiǎn)便，靈敏度高，結(jié)果準(zhǔn)確。
♠　【關(guān)鍵詞】多序巖黃芪根；芒柄花素；薄層-紫外分光光度法多序巖黃芪HedysarumpolybotrysHand.-Mazz.為豆科（Leguminosae）巖黃芪屬植物。以根入藥，因其根皮呈紅棕色，故名紅芪。
♠　主要有補(bǔ)氣、利尿、托毒、排膿、斂瘡生肌等功效。主治氣短、心悸、慢性腎炎等［1］。多序巖黃芪主產(chǎn)于甘肅、新疆、青海、內(nèi)蒙古等地，資源豐富。
♠　據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，芒柄花素（Formononetin）具有雌激素樣、抗氧化及提高免疫力等作用。多序巖黃芪根中主要的化學(xué)成分芒柄花素含量高，用TLCUV法測(cè)定多序巖黃芪根中芒柄花素含量尚未見(jiàn)報(bào)道。本文報(bào)道用TLCUV法測(cè)定多序巖黃芪根中芒柄花素含量。
♠　儀器與材料：樣品來(lái)源多序巖黃芪購(gòu)于甘肅，由北京大學(xué)藥學(xué)院天然藥物學(xué)系楊虎彪教授鑒定。
♠　儀器與試劑S54紫外分光光度儀（上海棱光）；超聲清洗儀；硅膠G薄層板（青島海洋）；微量注射器（上海高鴿工貨有限公司）；芒柄花素對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所）；所用試劑均為分析純。
♠　方法與結(jié)果：對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取干燥恒重的芒柄花素對(duì)照品20mg于50ml容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得0.4mg/ml標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照液，貯存?zhèn)溆谩?br /> 供試品溶液的制備精密稱(chēng)取多序巖黃芪根粉2g，置100ml容量瓶中，加甲醇20ml，超聲提取30min，溫度40℃，提取3次，過(guò)濾，搖勻再精密吸取2ml至25ml容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，貯存?zhèn)溆谩?br /> ♠　芒柄花素的薄層層析展開(kāi)吸取天山巖黃芪提取液與芒柄花素對(duì)照品同時(shí)點(diǎn)在薄層板上，以石油醚∶醋酸乙酯（1∶1）為展開(kāi)劑展開(kāi)，距前沿一定距離時(shí)取出，晾干，在紫外燈下觀察色譜圖見(jiàn)圖1圖1看出，天山巖黃芪中存在芒柄花素和其它化學(xué)成分。
圖1芒柄花素的薄層展開(kāi)圖。
♠　芒柄花素波長(zhǎng)的選擇精密吸取1ml芒柄花素對(duì)照品溶液置于25ml容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，以甲醇為空白溶液，在S-54紫外分光光度計(jì)上掃描吸收光譜圖，掃描波長(zhǎng)范圍200～400nm，得知芒柄花素在214，248，302nm處有吸收峰，248nm處吸收峰，則選擇248nm為測(cè)定波長(zhǎng)見(jiàn)圖2。
♠　圖2芒柄花素紫外光譜圖
♠　標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制分別精密吸取芒柄花素溶液0.5，1，1.5，2，2.5，3ml置于10ml容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，以甲醇為空白溶液，置于紫外分分光光度計(jì)下，在248nm處測(cè)定吸光度，以濃度為橫坐標(biāo)，吸收度為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,回歸方程：Y=7.0286X-0.0193，相關(guān)系數(shù)r=0.9996，所以，芒柄花素在0.01～0.06mg/ml濃度范圍內(nèi)，吸收度與點(diǎn)樣濃度之間呈良好的線性關(guān)系。
♠　精密性實(shí)驗(yàn)精密吸取供試品溶液10μl，點(diǎn)于薄層板上，以石油醚∶醋酸乙酯（1∶1）為展開(kāi)劑展開(kāi)，晾干，在紫外燈下觀察并定位斑點(diǎn)位置，刮下對(duì)照品和與對(duì)照品相同位置的供試品斑點(diǎn)的硅膠，置于容量瓶中，加適量甲醇，超聲洗脫15min，過(guò)濾濾液至10ml的容量瓶中，用甲醇定容，于波長(zhǎng)248nm處連續(xù)測(cè)定5次吸光度，計(jì)算RSD值得0.8%，結(jié)果表明，本方法精密性良好。
♠　穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)精密吸取供試品溶液與對(duì)照品溶液品10μl，點(diǎn)于薄層板上，按“2.6”項(xiàng)下方法處理，于波長(zhǎng)248nm處連續(xù)測(cè)定0，0.5，1，2，3，4，5，6h范圍內(nèi)的吸光度，計(jì)算RSD值得1.8%，說(shuō)明樣品在6h內(nèi)芒柄花素的吸收度較穩(wěn)定。
♠　重復(fù)性實(shí)驗(yàn)精密吸取供試品溶液10μl，點(diǎn)于薄層板上，共5份，按“2.6”項(xiàng)下方法處理，于波長(zhǎng)248nm處測(cè)定吸收度，計(jì)算RSD值為0.3%，說(shuō)明樣品重復(fù)性較好。
♠　回收率實(shí)驗(yàn)精密稱(chēng)取紅芪根粉1.0g，共8份，分成4組每組2份。第1組作為本底值，在第2組，第3組，第4組中分別加入芒柄花素對(duì)照品溶液2.0，4.0，6.0ml，按“2.6”項(xiàng)下方法處理，于波長(zhǎng)248nm處測(cè)定吸收度根據(jù)回收率公式計(jì)算，平均回收率為97.55%，RSD=1.6%（n=8）。
♠　紅芪中芒柄花素的含量測(cè)定精密吸取供試品溶液10μl，共5份，按“2.6”項(xiàng)下方法處理，于248nm處測(cè)定吸光度，計(jì)算含量，結(jié)果是多序巖黃芪根中芒柄花素的含量為28.80μl/ml。
♠　討論：TLC-UV法測(cè)定序巖巖黃芪根中的芒柄花素含量，方法簡(jiǎn)便快速，精密度、穩(wěn)定性和重復(fù)性均良好，可作為準(zhǔn)確含量測(cè)定用。本實(shí)驗(yàn)可為多序巖黃芪的產(chǎn)品開(kāi)發(fā)提供一定的理論依據(jù)。